পদ্ধতি 1: নিষ্কাশন পদ্ধতি (বর্তমানে আমার দেশে নিযুক্ত পদ্ধতি; এটি কম বিশুদ্ধতা দেয় কিন্তু কম উৎপাদন খরচ দেয়।)
অক্সিটোসিন সলিউশন নিষ্কাশন: 100 গ্রাম শুকনো পিটুইটারি পাউডার এবং 30 গ্রাম কোয়ার্টজ পাউডার নিন, এগুলিকে একটি বল মিলের মধ্যে রাখুন এবং পাতিত জল যোগ করুন। এই একই পদ্ধতি ব্যবহার করে চারবার নিষ্কাশন করুন। প্রতিটি ধাপের জন্য যোগ করা পাতিত জলের পরিমাণ নিম্নরূপ: প্রথম দুটি নিষ্কাশনের জন্য 1.4 এল এবং পরবর্তী দুটির জন্য 1.3 এল৷ প্রতিটি নিষ্কাশন 45 মিনিটের জন্য বাহিত হয়, তরল সংগ্রহের জন্য সেন্ট্রিফিউগেশন দ্বারা অনুসরণ করা হয়; অবশিষ্ট অবশিষ্টাংশ তারপর আরো নিষ্কাশন অধীন হয়. চারটি ফলের নির্যাস একত্রিত করে অক্সিটোসিন দ্রবণ তৈরি করে। সংক্ষেপে: শুকনো পোস্টেরিয়র পিটুইটারি পাউডার [জল, বল মিল] → অক্সিটোসিন নির্যাস → ক্রোমাটোগ্রাফিক বিচ্ছেদ।
1,500 গ্রাম প্রি-চিকিত্সা করা সিন্থেটিক জিওলাইট নিন, একটি 0.25% অ্যাসিটিক অ্যাসিড দ্রবণের 20 L যোগ করুন এবং-নাড়ার পর-মিশ্রণটিকে একটি আয়ন-এক্সচেঞ্জ কলামে ঢেলে দিন৷ একবার অ্যাসিটিক অ্যাসিড দ্রবণের স্তর জিওলাইট বেডের পৃষ্ঠের উপরে 2-3 সেমি বিন্দুতে নেমে গেলে, অবিলম্বে অক্সিটোসিন নির্যাস চালু করুন। একটি উপযুক্ত প্রবাহ হার বজায় রাখুন এবং ফলস্বরূপ সাদা, টার্বিড ইলুয়েট সংগ্রহ করুন (এই ভগ্নাংশটিতে প্রাথমিকভাবে অক্সিটোসিন থাকে; যেহেতু অক্সিটোসিনের একটি আইসোইলেকট্রিক পয়েন্ট [pI] 7.7-যেখানে ভ্যাসোপ্রেসিনের একটি পিআই 10.9-ভাসোপ্রেসিন রয়েছে এবং সহজেই কোলম বা ধনাত্মক গঠনে পরিণত হয়)। নির্যাসের তরল স্তর জিওলাইট বেডের পৃষ্ঠে নেমে যাওয়ার সাথে সাথেই পাতিত জল যোগ করুন এবং প্রবাহ বন্ধ না হওয়া পর্যন্ত টার্বিড এলুয়েট সংগ্রহ করতে থাকুন। হিমবাহ এসিটিক অ্যাসিড ব্যবহার করে সংগৃহীত টারবিড এলুয়েটের pH 3.5 এ সামঞ্জস্য করুন। জলের স্নানে দ্রবণটিকে দ্রুত 95 ডিগ্রিতে গরম করুন, 3 মিনিটের জন্য এই তাপমাত্রা বজায় রাখুন, তারপরে দ্রুত দ্রবণটি ঠান্ডা করুন এবং সারারাত ফ্রিজে রাখুন। সংক্ষেপে: অক্সিটোসিন এক্সট্র্যাক্ট [HAc, সিন্থেটিক জিওলাইট কলাম] → টার্বিড এলুয়েট [HAc, হিটিং] → বিচ্ছিন্ন সমাধান → শোষণ এবং ইলুশন। পরের দিন, রেফ্রিজারেটেড দ্রবণটি ফিল্টার করুন। ফিল্টারে, নাড়ার সময় একটি 10% বেন্টোনাইট স্লারি যোগ করুন (প্রতি 100 মিলি ফিল্টারে 3 মিলি স্লারি যোগ করুন)। শোষণের সুবিধার্থে 1 ঘন্টা নাড়তে থাকুন, তারপর মিশ্রণটি সেন্ট্রিফিউজ করুন। একটি সালফোসালিসিলিক অ্যাসিড বিকারক দ্রবণ ব্যবহার করে সুপারনাট্যান্ট তরল পরীক্ষা করুন; কোনো প্রক্ষেপণের অনুপস্থিতি ইঙ্গিত দেয় যে শোষণ প্রক্রিয়া সম্পূর্ণ। শোষণ অসম্পূর্ণ হলে, bentonite চিকিত্সা প্রক্রিয়া পুনরাবৃত্তি; পরবর্তীকালে, উভয় শোষণ ধাপ থেকে প্রাপ্ত বেন্টোনাইট প্রিপিটেটগুলিকে একত্রিত করুন। 1% অ্যাসিটিক অ্যাসিড (যথাক্রমে 1.6 L, 1.4 L, 1.2 L, এবং 0.8 L ভলিউম সহ) ব্যবহার করে বেন্টোনাইট চারবার নির্গত হয়। প্রতিটি ইলুয়েটের জন্য, *tert*-butyltrichloride যোগ করা হয় একবার দ্রবণটি 80 ডিগ্রিতে উত্তপ্ত করা হয়; তারপর তাপমাত্রা 95 ডিগ্রীতে উন্নীত করা হয়, দ্রুত 25 ডিগ্রীতে ঠাণ্ডা করা হয় এবং হয় ফিল্টার বা কেন্দ্রীভূত করা হয়। চারটি ফলিত ফিল্ট্রেট শক্তি এবং ভাসোপ্রেসিন সীমা নির্ধারণ করতে একত্রিত হয়। প্রক্রিয়া প্রবাহটি নিম্নরূপ: রেফ্রিজারেটেড দ্রবণ [পরিস্রাবণ] → ফিল্টরেট [বেনটোনাইট স্লারি] → অ্যাডসরবেট [1% HAc] → ইলুয়েট। অক্সিটোসিন ইনজেকশনের প্রস্তুতি:
অ্যাসেইড অক্সিটোসিন দ্রবণ, মানের মান পূরণ করে, 5 U/mL বা 10 U/mL এর ঘনত্বে পাতলা করা হয়। তারপর এটিকে No. 4 বা No. 5 সিনটারড গ্লাস ফানেলের মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়, অ্যাম্পুলে ভর্তি করা হয় এবং চূড়ান্ত পণ্যটি পাওয়ার জন্য 100 ডিগ্রিতে প্রবাহিত বাষ্প ব্যবহার করে জীবাণুমুক্ত করা হয়। প্রক্রিয়া প্রবাহটি নিম্নরূপ: অক্সিটোসিন সলিউশন (অ্যাসে অনুমোদিত) [পরিস্রাবণ, ফিলিং, জীবাণুমুক্তকরণ] → অক্সিটোসিন ইনজেকশন।
সিন্থেটিক জিওলাইটের পুনর্জন্ম: সিন্থেটিক জিওলাইট পাতিত জল দিয়ে দুবার ধুয়ে ফেলা হয়। তারপরে, 1.5 লিটার জল (500 গ্রাম জিওলাইটের উপর ভিত্তি করে গণনা করা হয়) এবং 150 গ্রাম সোডিয়াম ক্লোরাইড যোগ করা হয়, এবং মিশ্রণটি ধুয়ে ফেলার জন্য এবং ভাসোপ্রেসিন অপসারণের জন্য 2 ঘন্টা নাড়াচাড়া করা হয়। জিওলাইট তারপর পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয় যতক্ষণ না কোনও ক্লোরাইড আয়ন অবশিষ্ট থাকে। উপযুক্ত পরিমাণে জল যোগ করা হয়, এবং সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড ব্যবহার করে pH 9 এ সামঞ্জস্য করা হয়; মিশ্রণটি 30 মিনিটের জন্য নাড়াচাড়া করা হয়, যার পরে সুপারনাট্যান্ট ডিক্যান্ট করা হয়। জিওলাইট পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়, সালফিউরিক অ্যাসিড ব্যবহার করে pH 5.5-6 এ সামঞ্জস্য করা হয় এবং প্রায় নিরপেক্ষ না হওয়া পর্যন্ত এটি আবার জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়। তারপরে অতিরিক্ত জল অপসারণের জন্য এটি ফিল্টার করা হয় এবং ভবিষ্যতে ব্যবহারের জন্য 105 ডিগ্রিতে শুকানো হয়। ব্যবহারের আগে, উপযুক্ত পরিমাণে জল যোগ করা হয়, এবং ভিজানোর অনুমতি দেওয়ার জন্য নাড়ার সময় গ্লাসিয়াল অ্যাসিটিক অ্যাসিড ব্যবহার করে পিএইচ সামঞ্জস্য করা হয়। 10% বেন্টোনাইট স্লারি তৈরি: বেন্টোনাইট এবং জল 1:10 এর ভলিউম অনুপাতে ভর-থেকে{18}}মিশ্রিত হয়। মিশ্রণটি প্রায় 1 ঘন্টার জন্য মাটিতে থাকে, এই সময়ে 3.5 এর স্থিতিশীল pH বজায় রাখতে অ্যাসিটিক অ্যাসিড যোগ করা হয়। ফলস্বরূপ স্লারি ভবিষ্যতে ব্যবহারের জন্য একটি রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করা হয়। পদ্ধতি 2: রাসায়নিক সংশ্লেষণ। প্রথমত, হেপ্টাপেপটাইড অ্যামাইড (সেগমেন্ট 3-9) বেনজাইলোক্সাইকার্বনিল-লিউসিন *p*-নাইট্রোফেনাইল এস্টার থেকে শুরু করে সংশ্লেষিত হয়; এরপরে, বেনজিলক্সিকার্বোনিল-এস-বেনজিলসিস্টাইন-টাইরোসিন অ্যাজিড (সেগমেন্ট 1-2) সংশ্লেষিত হয়; এবং তৃতীয় ধাপে, অক্সিটোসিন সংশ্লেষিত হয়।